1. Hvad er cellekultur?
Cellekultur refererer til at fjerne celler fra dyr eller planter og derefter dyrke dem i et gunstigt kunstigt miljø.Cellerne kan tages direkte fra vævet og nedbrydes ved hjælp af enzymatiske eller mekaniske midler før dyrkning, eller de kan stamme fra etablerede cellelinjer eller cellelinjer.
2.Hvad er primærkultur?
Primær kultur refererer til kulturstadiet efter celler er adskilt fra vævet og formerer sig under passende betingelser, indtil de optager alle tilgængelige substrater (det vil sige når sammenløb).På dette stadium skal cellerne subkultiveres ved at overføre dem til en ny beholder med frisk vækstmedium for at give mere plads til fortsat vækst.
2.1 Cellelinje
Efter den første subkultur kaldes den primære kultur en cellelinje eller subklon.Cellelinjer, der stammer fra primære kulturer, har en begrænset levetid (dvs. de er begrænset; se nedenfor), og efterhånden som de passerer, dominerer cellerne med den højeste vækstkapacitet, hvilket resulterer i en vis grad af genotype i populationen, der fortsætter med fænotype.
2.2 Cellestamme
Hvis en subpopulation af en cellelinje selekteres positivt fra kulturen ved kloning eller en anden metode, ville cellelinjen blive en cellestamme.Cellestammer erhverver normalt yderligere genetiske ændringer, efter at forældrelinjen starter.
3.Begrænsede og kontinuerlige cellelinjer
Normale celler deler sig normalt kun et begrænset antal gange, før de mister evnen til at formere sig.Dette er en genetisk bestemt begivenhed kaldet senescence;disse cellelinjer kaldes endelige cellelinjer.Nogle cellelinjer bliver dog udødelige gennem en proces kaldet transformation, som kan forekomme spontant eller kan induceres af kemikalier eller vira.Når en finit cellelinje gennemgår transformation og får evnen til at dele sig i det uendelige, bliver den en kontinuerlig cellelinje.
4. Kulturtilstand
Dyrkningsbetingelserne for hver celletype er meget forskellige, men det kunstige miljø til dyrkning af celler er altid sammensat af en passende beholder, som indeholder følgende:
4.1 Substrat eller kulturmedium, der giver essentielle næringsstoffer (aminosyrer, kulhydrater, vitaminer, mineraler)
4.2 Vækstfaktorer
4.3 Hormoner
4.4 Gasser (O2, CO2)
4.5 Reguleret fysisk og kemisk miljø (pH, osmotisk tryk, temperatur)
De fleste celler er forankringsafhængige og skal dyrkes på et fast eller halvfast substrat (adhærent eller monolag kultur), mens andre celler kan vokse flydende i mediet (suspensionskultur).
5. Kryokonservering
Hvis der er overskydende celler i subkulturen, skal de behandles med et passende beskyttelsesmiddel (såsom DMSO eller glycerol) og opbevares ved en temperatur under -130°C (kryokonservering), indtil de er nødvendige.For mere information om subkultur og kryokonservering af celler.
6. Morfologi af celler i kultur
Celler i kultur kan opdeles i tre grundlæggende kategorier baseret på deres form og udseende (dvs. morfologi).
6.1 Fibroblastceller er bipolære eller multipolære, har en aflang form og vokser knyttet til substratet.
6.2 Epitellignende celler er polygonale, har en mere regelmæssig størrelse og er knyttet til matrixen i diskrete ark.
6.3 Lymfoblastlignende celler er sfæriske og vokser sædvanligvis i suspension uden at binde sig til overfladen.
7.Anvendelse af cellekultur
Cellekultur er et af de vigtigste værktøjer, der bruges i celle- og molekylærbiologi.Det giver et fremragende modelsystem til at studere den normale fysiologi og biokemi af celler (såsom metabolisk forskning, aldring), virkningerne af lægemidler og toksiske forbindelser på celler og mutagenese og kræftfremkaldende virkninger.Det bruges også til lægemiddelscreening og udvikling og storskala fremstilling af biologiske forbindelser (såsom vacciner, terapeutiske proteiner).Den største fordel ved at bruge cellekultur til enhver af disse applikationer er konsistensen og reproducerbarheden af de resultater, der kan opnås ved brug af en batch af klonede celler.
Indlægstid: Jun-03-2019